Evaluation of indirect immunoenzymatic test (ELISAi) for vaccine antibodies against Brucella abortus B19

Abstract

La brucelosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa causada tradicionalmente por la bacteria Brucella abortus. El diagnóstico por métodos serológicos y la vacunación con la cepa B. abortus B19 son las formas convencionales y tradicionales de control de enfermedades. La prueba de detección serológica oficial estándar en Brasil es el Antígeno Tamponado Acidificado (AAT), sin embargo, no se acepta internacionalmente y se necesitan más pruebas para su validación al exportar animales. En vista de lo anterior, el objetivo fue evaluar y validar un protocolo ELISA indirecto para suero de animales vacunados, teniendo moléculas solubles extraídas de una vacuna comercial de la muestra de B. abortus B19 como el antígeno para sensibilizar de la placa de poliestireno. Paralelamente, la prueba AAT se utilizó como control para los resultados obtenidos. Con este fin, se recogió suero de 22 novilla vacunadas con B19 en propiedades rurales del estado de Espírito Santo, Brasil, en los tiempos máximos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación y se realizaron pruebas indirectas de ELISA y AAT para verificar la presencia cualitativa de anticuerpos. Los resultados se evaluaron utilizando las pruebas estadísticas chi-cuadrado de dos variables para verificar la asociación entre los resultados. Se calculó el índice de concordancia de Kappa, así como la sensibilidad y especificidad, y los valores predictivos positivos y negativos. El protocolo ELISAi utilizando antígenos de B. abortus solubles de este experimento mostró sensibilidad (0,7826) y especificidad (0,3023) alcanzando el objetivo de este experimento para detectar anticuerpos anti-Brucella en novillas vacunadas con B19 en los tiempos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación. Sin embargo, se observó que no existe una asociación significativa entre los resultados de las pruebas AAT y ELISAi como se muestra en la prueba de chi-cuadrado para la tabla de contingencia 2x2 (χ2 = 0,545, p = 0,46).