Avaliação da expressão de seis possíveis fatores de virulência de C. pseudotuberculosis em macrófagos murinos

Resumo

Corynebacterium pseudotuberculosis é uma bacilo Gram-positivo causador da linfadenite caseosa em caprinos e ovinos. Dentre os seus possíveis fatores de virulência estão as proteínas pld (Fosfolipase D), cpp (Serina-protease CP40), nanH (Neuraminidase H), sodC (Superóxido Dismutase C), spaC (Adesina SpaC) e pknG (Proteína cinase G). Objetivo: este estudo buscou verificar, com a técnica qRT-PCR, se existe transcrição destes genes em macrófagos de duas linhagens de camundongos infectados in vitro com uma cepa viruleta C. pseudotuberculosis (CP1002). Paralelamente, também foi estudada a expressão dos genes pld, cpp, nanH, sodC e spaC nestas mesmas células. Método: extraiu-se o RNA total de macrófagos de camundongos C57BL/6 e Balb/c e sintetizou-se o DNA complementar ao RNA extraído. A detecção de RNA mensageiro de PknG, Pld, CP40, NanH, SodC e SpaC foi realizada por PCR quantitativa. Resultados: houve expressão dos seis genes nos macrófagos de camundongos das linhagens Balb/c e C57BL/6 infectados in vitro, nos três intervalos de tempo examinados (1, 12 e 24 horas após a infecção). A intensidade de transcrição dos genes pknG, pld, cpp, nanH, sodC e spaC uma hora após a infecção aparenta ser maior do que nos intervalos posteriores, tanto em macrófagos de Balb/c como em macrófagos de C57BL/6, embora nos primeiros todos os genes mostrem uma intensidade de transcrição supostamente mais acentuada neste intervalo. O gene pknG aparenta uma magnitude de transcrição mais intensa do que os demais, em ambos os tipos de animais. Conclusão: os genes pknG, pld, cpp, nanH, sodC e spaC são transcritos em macrófagos de Balb/c e de C57BL/6, expressando-se aparentemente de modo mais acentuado na primeira hora após a infecção em ambos os tipos de células. Todos os genes parecem exibir transcrição mais intensa em macrófagos dos animais da linhagem Balb/c.